本產(chǎn)品是專(zhuān)為 Real-time RT-PCR 而研發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑混合液。5× SuperQuick RT MasterMix中包含SuperQuickRT逆轉(zhuǎn)酶、 Rnase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer 等從 RNA模板逆轉(zhuǎn)錄成 cDNA 第 一鏈所需的全部試劑。該產(chǎn)品的逆轉(zhuǎn)錄效率高，可對(duì)少量 RNA 模板進(jìn)行良好 的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，15 分鐘即可完成熒光定量模板 cDNA***鏈合成。另外，逆轉(zhuǎn) 錄反應(yīng)溫度可以提高到 50℃，可通讀 GC含量高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA模板。 本試劑盒操作十分方便快捷，僅需加入 RNA 模板和水即可進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)， 特別適合于高通量檢測(cè)。

產(chǎn)品特點(diǎn)1．簡(jiǎn)便：即用型逆轉(zhuǎn)錄 Mix，只需加入 RNA 模板和水，便可進(jìn)行反應(yīng)。2．快速：15 分鐘完成 cDNA 第一鏈合成。3．反轉(zhuǎn)錄效率高：反轉(zhuǎn)錄效率高于 90%。4．靈敏度高：pg 級(jí)模板也可以得到高質(zhì)量的 cDNA。5．通讀復(fù)雜模板：GC 含量高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜模板。注意事項(xiàng)1．在操作過(guò)程中應(yīng)避免 Rnase 污染，防止 RNA 降解或?qū)嶒?yàn)中的交叉污染，建議操作人員帶口罩和一次性手套并經(jīng)常更換手套，使用專(zhuān)門(mén)的儀器和耗材。2．逆轉(zhuǎn)錄體系配制在冰上進(jìn)行操作，防止 RNA 發(fā)生降解。試劑盒的 MasterMix使用后盡快置于-20℃保存，并盡量避免反復(fù)凍融。3．反應(yīng)體系可倍比放大，10ul 反應(yīng)體系可最大使用 1ug 總 RNA。4．對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA 模板，建議在操作步驟之前，將模板 RNA 在 65℃孵育 5min 立刻置于冰上，短暫離心后進(jìn)行下一步操作。使用方法1．將模板 RNA 在冰上解凍；將試劑盒組分在室溫解凍后立刻置于冰上，使用前將每種溶液渦旋振蕩混勻，并經(jīng)短暫離心后使用。2．根據(jù)以下表格配制反應(yīng)體系（反應(yīng)液配制請(qǐng)?jiān)诒线M(jìn)行），渦旋震蕩混勻，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。

注意：1） 如果總RNA量大于1ug，請(qǐng)按比例擴(kuò)大反應(yīng)體系。2）5×SuperQuick RT MasterMix中含有Oligo(dT)、Random primer、RnaseInhibitor、dNTPs、RT Buffer等。3．42 ℃孵育15分鐘。注意：對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜或GC含量高的模板，可以提高逆轉(zhuǎn)錄溫度至50℃，增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄效率。4．85℃孵育5分鐘，使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。5．短暫離心后置于冰上，再進(jìn)行后續(xù)Real-time PCR檢測(cè)，如果需要長(zhǎng)時(shí)間保存，請(qǐng)置于-20℃。注意：進(jìn)行Real-time PCR反應(yīng)時(shí)，逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加量應(yīng)不超過(guò)PCR反應(yīng)總體積的1/10。