簡要描述:植物原花青素(OPC)測試盒 植物原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。
詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
植物原花青素(OPC)測試盒
微量法100T/48S
注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一類黃烷醇單體及其聚合體的多酚化合物,廣泛存在于植物的各種器官中,具有強的抗氧化性和清除自由基的作用,廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥,食品,化妝品,保健品行業(yè)。
測定原理:
在酸性條件下,植物原花青素A環(huán)上的間苯二酚和間苯三*與香草醛發(fā)生縮合反應(yīng),產(chǎn)生有色化合物,在500nm處有特征吸收峰,測定500nm光吸收值,可計算植物中原花青素的含量。
自備實驗用品及儀器:
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、鹽酸、無水乙醇和甲醇。
試劑組成和配制:
提取液:60%乙醇,自備,4℃保存。(60mL無水乙醇溶于40mL蒸餾水)
試劑一:8%鹽酸10mL,自備,4℃保存。(800μL鹽酸溶于9.2mL甲醇)
試劑二:粉劑0.1g×1瓶,4℃避光保存,臨用前加10mL甲醇溶解。
測定工作液:臨用前按照用量將試劑一和試劑二按照1:1混合。
空白工作液:臨用前按照用量將試劑一和甲醇按照1:1混合。
OPC提取:
稱取約0.1g樣本,加入2mL提取液,勻漿后,60℃振蕩提取2h, 10000g,25℃,離心10min,取上清待測。
測定操作表:
分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至500nm,蒸餾水調(diào)零。
操作表
對照管 | 測定管 | |
樣本(μL) | 40 | 40 |
測定工作液(μL) | 160 | |
空白工作液(μL) | 160 | |
混勻,30℃水浴30min,于微量石英比色皿/96孔板中檢測500nm處吸光值,ΔA=A測定-A對照,每個測定管設(shè)一個對照管。 |
OPC計算公式:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0194x+0.0006,R2=0.999
OPC含量(mg/g 鮮重)= (ΔA-0.0006)÷0.0194×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 0.515×(ΔA-0.0006)÷W
V樣總:加入提取液體積,2mL; V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.04mL;W:樣品質(zhì)量,g
b.用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0097x+0.0006,R2=0.999
OPC含量(mg/g 鮮重)= (ΔA-0.0006)÷0.0097×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 1.03×(ΔA-0.0006)÷W
V樣總:加入提取液體積,2mL; V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.04mL;W:樣品質(zhì)量,g
注意事項:
1、配制好的試劑二應(yīng)盡快使用,4℃保存時間不超過一個月。
2、吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~0.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計算公式中參與計算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。
3、*低檢出限為10μg/g。
上海牧榮生物科技有限公司
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