iLite ®基于細胞的檢測基于簡單的報告基因技術(shù)。對特定靶標(biāo)或配體具有特異性的受體在細胞表面表達。一旦配體與受體結(jié)合,就會觸發(fā)細胞內(nèi)信號級聯(lián),從而導(dǎo)致啟動子區(qū)域與報告基因融合,在本例中為螢火蟲熒光素酶。報告基因的激活以及底物的添加將產(chǎn)生光。光量與與受體結(jié)合的配體的量和活性相關(guān)。
就iLite技術(shù)而言,存在第二個報告基因,此處顯示為海腎熒光素酶。該報告基因受到組成型啟動子的控制,因此在任何活細胞中始終處于活躍狀態(tài)。換句話說,從第二個報告基因產(chǎn)生的光量將與活細胞的數(shù)量相關(guān),因此可用于標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果以補償細胞數(shù)量的差異。
iLite技術(shù)提供了一種基于細胞的功能檢測形式,具有許多通常與配體結(jié)合檢測相關(guān)的功能和優(yōu)點。該技術(shù)基于報告基因格式,已針對整個藥物開發(fā)過程中的應(yīng)用進行了修改和調(diào)整。