生物綴合物是指一個分子通常通過共價鍵連接到另一個分子上,以形成由兩個連接在一起的分子組成的復(fù)合物。生物共軛技術(shù)在開發(fā)針對特定目標的衍生蛋白質(zhì)、DNA、RNA和碳水化合物的新型研究方面具有廣泛的應(yīng)用,例如配體發(fā)現(xiàn)、疾病診斷和高效篩選。這是一個具有廣闊前景的研究領(lǐng)域。
生物共軛是兩個生物分子共價鍵合的過程。常見的生化偶聯(lián)包括賴氨酸氨基酸殘基的胺偶聯(lián)、半胱氨酸殘基的硫氫基偶聯(lián),以及常常由光化學(xué)引發(fā)的自由基反應(yīng)。生物共軛的產(chǎn)物是生物共軛物。
最常見的生物偶聯(lián)是小分子的偶聯(lián),例如生物素與蛋白質(zhì)的偶聯(lián);以及蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的偶聯(lián),例如抗體與酶的偶聯(lián)。其他不常見的偶聯(lián)分子,如寡糖、核酸、合成聚合物:聚乙二醇、碳納米管。生物綴合物包括抗體-藥物復(fù)合物 (ADC)、聚乙二醇化蛋白、siRNA 復(fù)合物和疫苗復(fù)合物。
小分子屬于半抗原,僅具有反應(yīng)性但不具有免疫原性。它們只有與載體(通常是蛋白質(zhì),也有多肽)偶聯(lián)形成完整抗原后才具有免疫原性,進入動物體內(nèi)后才會產(chǎn)生抗體。 。載體蛋白是能夠自行引發(fā)免疫反應(yīng)的大分子。許多不同類型的載體蛋白可以與小分子綴合以制備完整抗原。常用的載體包括牛血清白蛋白、匙孔血藍蛋白、卵清蛋白、牛甲狀腺球蛋白等。載體蛋白的選擇主要涉及其溶解度、大小、偶聯(lián)基團、免疫原性、成本等因素。目前市場上應(yīng)用廣泛的牛血清白蛋白BSA主要是由于BSA化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不易變性,分子中含有多種氨基,且賴氨酸含量高,廉價易得。但 BSA 限制了其在一些免疫測定實驗中作為封閉劑的用途。第二個選擇是匙孔血藍蛋白KLH和卵清蛋白OVA。
1、對于帶有羧基或氨基的化合物,采用碳二亞胺法和混合酸酐法;
2、含有巰基的化合物,采用馬來酰亞胺法;
3、對于分子結(jié)構(gòu)中帶有氨基的化合物,戊二醛法是常用的方法。
1.生化評估:
綴合小分子可用作嚴格生化分析的探針,生物素等非熒光小分子也可用作機械探針。
2.診斷應(yīng)用:
臨床樣本的定性和定量分析對于早期疾病診斷至關(guān)重要,抗體-抗原相互作用的高特異性避免了樣本純化,可廣泛應(yīng)用。
3、工業(yè)應(yīng)用:
生物共軛可用于很多行業(yè),可以用于食品行業(yè),如異構(gòu)化富馬酸和蘋果酸,用于食品殘留檢測;醫(yī)藥工業(yè)利用固定化酶進行藥物合成,也可用于藥物檢測。代理檢測等